Что такое дополнительное исследование в анализе на гепатит и каковы его функции

Дополнительное исследование подтверждающим тестом в анализе на гепатит C означает, что первоначально полученные результаты требуют дополнительной проверки для более точной диагностики. Это может быть связано с тем, что результаты первичных тестов могут быть неясными или неполными, и для окончательного заключения необходимо провести более специфичное и чувствительное исследование.

Подтверждающий тест обычно включает тестирование на антитела к вирусу гепатита C или молекулярные методы, такие как ПЦР, которые помогут установить наличие вируса в крови. Таким образом, это исследование позволяет врачам более достоверно оценить состояние пациента и назначить соответствующее лечение.

Суммарные антитела классов M и G (anti-HCV IgG и anti-HCV IgM) к вирусу гепатита C (Hepatitis C virus) в крови (скрининг гепатита С — качественное исследование)

В современном мире уже стала очевидной острота проблемы, связанной с данной инфекцией: высокая вероятность возникновения хронических форм, отсутствие ярких симптомов на ранних стадиях и начальные проявления болезни только на поздних этапах, такие как цирроз печени, чёткая взаимосвязь с развитием гепатоцеллюлярной карциномы. В 2016 году Всемирная организация здравоохранения приняла стратегию глобальной борьбы с вирусными гепатитами, направленную на их полное искоренение к 2030 году. Основные задачи этой программы, которая была принята 194 государствами, заключаются в снижении случаев нового заражения вирусными гепатитами на 90% и числа летальных исходов на 65% по сравнению с данными 2016 года.

Актуальность данной проблемы также подтверждается тем, что отмечается высокая частота коинфекции вирусом гепатита С (ВГС) и вирусом гепатита В (ВГВ). У пациентов с хроническим гепатитом С ВГВ выявляется в 22% случаев, что подчеркивает необходимость вакцинации людей с хроническим гепатитом С, не имеющих коинфекции с ВГВ, против вирусного гепатита В. Зафиксирована также низкая частота перинатальной передачи ВГС от матери к ребенку (3,5%), в то время как у женщин с комбинированной инфекцией ВГС и ВИЧ данный показатель составляет 14–16%.

К группам риска заражения ВГС относятся: медицинские работники, наркозависимые, пациенты с ВИЧ, люди, делавшие татуировки нестерильными инструментами, пациенты, получавшие переливание крови или ее компонентов до 1992 года, лица, находящиеся на гемодиализе, а также дети, рожденные от матерей с ВГС.

Большинство пациентов с ОГС не демонстрируют каких-либо симптомов заболевания, у некоторых из них наступает спонтанная элиминация вируса, с которой ассоциируются следующие факторы: женский пол, молодой возраст, течение заболевания с клинической симптоматикой, клиренс РНК ВГС в течение 4 недель от начала клинической манифестации заболевания, генотип интерлейкина 28В (ИЛ 28В) СС. Однако ни один из этих параметров не может лечь в основу предсказания характера течения заболевания у каждого конкретного пациента.

В анализах на гепатит С дополнительное исследование, подтверждающее тестом, играет ключевую роль в оценке наличия или отсутствия вирусной инфекции. Оно необходимо для того, чтобы исключить ложноположительные результаты, которые могут возникнуть при первых скрининговых тестах. Основная задача подтверждающего теста заключается в том, чтобы подтвердить факт наличия антител к вирусу гепатита С и оценить активность заболевания.

Подтверждающие тесты, такие как PCR (полимеразная цепная реакция), позволяют выявить наличие РНК вируса в крови пациента. Это исследование является более специфичным и чувствительным, что делает его идеальным для постановки окончательного диагноза. Если скрининговый тест показал положительный результат, проведение подтверждающего теста необходимо для определения стадии заболевания и возможности начала лечения.

Таким образом, дополнительное исследование с использованием подтверждающего теста обеспечивает высокую степень уверенности в диагностике гепатита С. Это особенно важно, так как от правильного диагноза зависит выбор лечения и дальнейший прогноз для пациента. Заболевание требует внимательного подхода, и четкая интерпретация результатов тестов помогает избежать ненужной паники и дает возможность вовремя начать терапию.

Хронический гепатит С представляет собой долговременное заболевание печени, продолжающееся более шести месяцев, вызванное инфицированием и повреждением печени вирусом гепатита С, и характеризующееся морфологическими изменениями, такими как некроз, воспаление и фиброз печени различной степени тяжести.

Последствия инфекции, вызванной ВГС, могут варьироваться от минимального до серьезного поражения печени, включая цирроз и гепатоцеллюлярную карциному. Через 20-30 лет после инфицирования риск развития цирроза варьируется от 4 до 45%. Прогрессирование фиброза печени происходит в нелинейной манере и, как правило, продолжается от 20 до 40 лет после заражения. У некоторых пациентов этот процесс происходит крайне медленно.

Выделен ряд факторов, которые могут оказывать отрицательное влияние на естественное течение гепатита С: возраст старше 40 лет к моменту инфицирования, мужской пол, раса (неевропейская), злоупотребление алкоголем, ожирение, нарушение обмена железа, метаболический синдром и др.

Поскольку гепатит С зачастую протекает без явных симптомов, для его диагностики необходимо проводить скрининг среди населения. В Российской Федерации группы населения, подлежащие обязательному обследованию на гепатит С, определены в СанПиНе 3.1.3112-13 «Профилактика гепатита С». Обычно для скрининга достаточно провести анализ на наличие антител к ВГС (анти-ВГС), однако в некоторых случаях может потребоваться одновременное тестирование на антитела и РНК ВГС. Это бывает необходимо, когда важно выявить заболевание на ранних этапах, еще до появления антител (например, у доноров) или когда антитела могут отсутствовать вовсе (обычно у людей с иммунодефицитом).

Подтверждение диагноза гепатита С осуществляется на основе выявления специфических маркеров – определения общего количества антител к гепатиту С и исследование маркерного спектра, состоящего из антител к структурным и неструктурным белкам вируса классов М и G.

Антитела класса М к core-антигену начинают появляться в крови через две недели с момента начала заболевания и могут обнаруживаться как при остром, так и хроническом течении болезни. Наличие антител класса М у новорожденного, рожденного от матери, инфицированной гепатитом С, свидетельствует о внутриутробном инфицировании. Антитела класса G начинают синтезироваться примерно через 3-4 недели с момента заболевания, и их уровень остается высоким на протяжении значительного времени.

При положительном результате на суммарные антитела в вирусу гепатита С (анти-HCV) обязательно необходимо проводить подтверждающее исследование, используя тест на выявление маркеров гепатита и определение РНК вируса с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени.

Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С в Москве

Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита С — показатель инфицированности вирусом гепатита С, посредством обнаружения в крови одновременно антител класса IgG и IgM, образующихся к белкам вируса гепатита С для подтверждения скрининговых исследований.

Гепатит С является одной из самых тяжелых форм вирусных заболеваний, поражающих не только клетки печени, но и некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).

Основные пути передачи вируса гепатита С следующие:

• через кровь и/или другие биологические жидкости инфицированного лица;
• трансплацентарно;
• реже — половым путем и через парентеральный путь (например, от матери к ребенку).

Клиническая картина при гепатите С Основные клинические проявления гепатита С очень неспецифичны: слабость, утомляемость, тошнота, отсутствие аппетита, потеря веса; при циррозе печени может появиться желтуха. Как правило, гепатит С протекает бессимптомно и в большинстве случаев диагностируется случайно. Гепатит C может вызвать как острую, так и хроническую инфекцию гепатита, которая влечет серьёзное пожизненное заболевание. Особо тяжёлый исход хронического гепатита С — цирроз печени и гепато-целлюлярная карцинома.

В отличие от других вирусных гепатитов, гепатит С имеет менее выраженные клинические проявления и в большинстве случаев переходит в хроническую форму. Хронический гепатит С часто ведет к циррозу печени и крайне редко — к гепатоцеллюлярной карциноме. Также с высокой вероятностью развиваются аутоиммунные расстройства. Инкубационный период составляет от 5 дней до 3 недель.

В конце инкубационного периода повышаются уровни печёночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезёнки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В 30% случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Очень редко возникает холестаз.

Лабораторные показатели отражают цитолиз.

В норме антитела к вирусу гепатита С в крови отсутствуют.

Вирус гепатита С содержит в своем геноме ряд белков, к которым образуются антитела. Это нуклеокапсидный белок C — core, оболочечные белки E1 и E2, а также протеазы NS1, NS2, NS3, NS4, NS5. Антитела к этим белкам можно обнаружить в сыворотке крови.

Появление суммарных антител к вирусу гепатита С у человека характеризуется вариабельностью, но в среднем продукция антител начинается с 3–6 недель после инфицирования. Первыми, с 3–6 недель заболевания, начинают образовываться антитела класса IgM. Через 1,5–2 месяца начинается заметная выработка антител класса IgG, достигая максимума концентрации к 3–6 месяцу заболевания.

Этот вид антител может обнаруживаться в сыворотке крови годами. Следовательно, обнаружение антител позволяет провести диагностику инфицирования гепатитом С, начиная с 3–6 недель и более после инфицирования. Следует учитывать, что обнаружение антител класса IgM и IgG в такой постановке метода (ИФА) является скрининговым и недостаточным для постановки диагноза вирусного гепатита С и требует проведения подтверждающего теста. Принимая во внимание чувствительность современных тест-систем (метод ИФА), проводить исследование рекомендуется не раньше 4–6 недель после возможного инфицирования.

• подозрение на вирусный гепатит;
• положительные и сомнительные результаты предварительных исследований на вирусный гепатит С (общее определение антител к гепатиту С);
• подтверждение инфицирования вирусом гепатита С, полученное на основе ранее выполненных положительных или сомнительных тестов.

Результаты интерпретируются следующим образом: антитела к белкам вируса гепатита С в сыворотке крови обычно не обнаруживаются.

Положительный результат означает наличие инфекции вирусом гепатита С.

Что значит в анализе на гепатит с дополнительное исследование подтверждающим тестом

Главная / Helixbook / Вирусный гепатит С. Анализы для первичного выявления заболевания. Обследование контактных лиц /

40-094 Вирусный гепатит С. Анализы для первоначального выявления заболевания. Обследование контактировавших лиц.

Исследование проводится в целях первичного выявления вируса в организме и включает в себя определение в крови специфических маркеров инфицирования – суммарных антител ( IgG , IgM ) к вирусу гепатита С и вирусной РНК.

Какие тесты входят в данный комплекс:

• anti-HCV, антитела
• HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить жирную пищу из рациона в течение 24 часов до анализа.
• Не курить за 30 минут до сдачи анализа.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (ВГС) – РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae , который поражает клетки печени и вызывает гепатит. Он способен размножаться в клетках крови (нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах) и ассоциирован с развитием криоглобулинемии, болезни Шегрена и В-клеточных лимфопролиферативных заболеваний. Среди всех возбудителей вирусных гепатитов у ВГС наибольшее количество вариаций, а благодаря высокой мутационной активности он способен избегать защитных механизмов иммунной системы человека. Существует 6 генотипов ВГС, не исключена возможность инфицирования человека одновременно несколькими вирусами с различными генотипами. В 60-80 % случаев острая инфекция переходит в хроническую.

Для лабораторной диагностики данного заболевания применяются два основных подхода:

— серологические методы, основанные на определении специфических антител к вирусу (anti-HCV);

— молекулярно-биологические методы, основанные на выявлении РНК вируса (реал-тайм ПЦР).

Антитела к вирусу гепатита С (anti-HCV) представляют собой специфические иммуноглобулины классов IgM и IgG, создающиеся к белкам вируса. Их наличие в крови может указывать на текущую или ранее перенесенную инфекцию. Однако единственным надежным критерием наличия вируса в организме является обнаружение вирусной РНК, которая определяется уже через 1-2 недели после заражения, тогда как антитела появляются в среднем через 8 недель. Определение вирусной РНК также подходит для обследования тех пациентов, у которых антитела не обнаружены по причине сопутствующих заболеваний или иных факторов (например, ВИЧ, постоянный гемодиализ).

Выявление РНК вируса считается «золотым стандартом» в диагностике гепатита С и подтверждает положительный результат обнаружения антител (anti-HCV) к белкам вируса и свидетельствует о наличии и репликации (размножении) вируса в крови.

Современные молекулярно-биологические методы диагностики обладают высокой чувствительностью (98-99 %) и в сочетании с серологическими исследованиями позволяют правильно оценить стадию заболевания, принять решение о тактике лечения, включая выбор препаратов и сроки медикаментозной терапии.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики вирусного гепатита С;
• для дифференциальной диагностики различных типов гепатитов;
• для установления наличия ранее перенесенного вирусного гепатита С.

Когда назначается исследование?

• При обследовании людей из группы риска по заражению вирусным гепатитом С;
• при положительных тестах на наличие антител к вирусу гепатита С для подтверждения диагноза;
• при наличии симптомов вирусного гепатита и повышенных уровнях печеночных трансаминаз;
• в случаях, когда известно о перенесенном гепатите неуточненной этиологии;
• при проведении скрининга;
• в случаях с сомнительными результатами серологического анализа;
• если ребенок родился от инфицированной матери;
• при проведении гемодиализа;
• до начала и после завершения терапии вирусного гепатита С, а также через 6 и 24 месяца после лечения.

Что означают результаты?

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

• [07-009] anti-HCV, антитела
• [09-011] HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]

1. Наличие антител (anti-HCV) не всегда свидетельствует о продолжающейся репликации вируса, так как это может быть признаком как активной, так и ранее перенесенной инфекции.

2. Отсутствие антител не исключает возможности инфекции, особенно на ранних стадиях острого гепатита C (ОГС) и при иммунодефиците.

3. Необходимо учитывать, что у реципиентов, которым была перелита инфицированная кровь, могут обнаруживаться антитела (anti-HCV) донора; их наличие не обязательно свидетельствует о заражении HCV.

4. Совместное обнаружение в крови РНК вируса и антител (anti-HCV) указывает на активное острое инфекционное заболевание или обострение хронического гепатита С (ХГС). Дифференциальная диагностика острого гепатита С в большинстве случаев должна основываться на наличии соответствующих данных эпидемиологического анамнеза за 1-4 месяца до обнаружения антител и увеличения активности печеночных ферментов.

5. Отсутствие РНК HCV при наличии антител (anti-HCV-позитивные образцы) в крови может являться признаком неустойчивой виремии, перенесенного острого гепатита, а также ложноположительного результата лабораторного исследования.

Интерпретация сочетаний серологических маркеров гепатита С

anti-HCV

РНК-HCV

Интерпретация результатов

Ранний период ОГС; ХГС на фоне иммуносупрессии; ложноположительный тест на РНК-HCV

Острый или хронический гепатит С

Элиминация вируса; острое течение гепатита С при низком уровне виремии

Что может влиять на результат?

• Наличие ревматоидного фактора в крови может приводить к ложноположительным результатам при тестировании на антитела к HCV.
• Высокий уровень криоглобулинов или присутствие гепарина в крови могут вызывать ложноотрицательные результаты при определении РНК вируса методом ПЦР.

Кто назначает исследование?

Инфекционист, гастроэнтеролог, гепатолог, эпидемиолог, терапевт.

Также рекомендуется

• Антитела к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С
• HCV, количественное определение РНК [реал-тайм ПЦР]
• HCV, генотипирование (типы 1a, 1b, 2, 3a, 4), РНК [реал-тайм ПЦР]

• HCV, обнаружение РНК количественно, высокочувствительный метод [реал-тайм ПЦР]
• [06-003] Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
• [06-010] Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
• [06-013] Гамма-глютамилтранспептидаза (гамма-ГТ)
• [40-120] Билирубин и его фракции (общий, прямой и непрямой)
• [06-045] Щелочная фосфатаза общая
• [06-004] Альбумин в сыворотке крови
• [03-011] Фибриноген
• [40-483] Лабораторное исследование функции печени
• [20-001] Фактор некроза опухоли-альфа (ФНО-альфа)
• [02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

Современная диагностика гепатита С и интерпретация результатов выявления маркеров инфицирования

Раздел только для специалистов в сфере медицины, фармации и здравоохранения!

Т.В. КОЖАНОВА, к.м.н., ФГБУ «Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова» РАМН, Научно-практический центр медпомощи детям Департамента здравоохранения г. Москвы

Вирусный гепатит С является одной из важнейших проблем мирового здравоохранения. Инфекция, вызванная вирусом гепатита С, часто протекает латентно, характеризуется минимальными клиническими проявлениями, а Высокой частотой хронизации. Гепатит С нередко диагностируется случайно, и во многих случаях пациенты остаются недообследованными. Доступные в настоящее время современные методы серологической (определение спектра антител к вирусу гепатита С) и молекулярной диагностики (качественный и количественный анализ выявления РНК вируса гепатита С, генотипирование) гепатита С позволяют выявить инфекцию на ранних сроках, определить необходимость назначения противовирусной терапии, оценить ее эффективность и вероятность достижения устойчивого ответа на лечение. Рассматривается проблема диагностики скрытого гепатита С.

Вирусный гепатит С (ГС) является одной из важнейших проблем мирового здравоохранения. Инфекция, вызванная вирусом ГС, часто протекает латентно, характеризуется минимальными клиническими проявлениями, а Высокой частотой хронизации. Предполагается, что в мире вирусом гепатита С (ВГС) инфицировано около 170 млн человек, при этом у них значительно повышен риск формирования цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы.

Клинические проявления гепатита С (ГС) такие, как усталость, мышечные боли, снижение аппетита или появление тошноты, являются неспецифическими и зачастую слабо выражены или даже отсутствуют. В результате диагностика ГС нередко происходит случайно, и многие пациенты не получают необходимого обследования. Около 30-50% людей, инфицированных вирусом гепатита С, даже не подозревают о наличии заболевания, и лишь немногие из них проходят противовирусное лечение (ПВТ), что снижает риск дальнейшей передачи вируса [1]. Хроническая форма ГС развивается у примерно 80% не получающих терапию пациентов, а у 20-40% из них может развиться цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома и последующая летальность [2].

С учетом этих факторов диагностику ГС рекомендуется проводить внимательно у всех людей с высоким уровнем печеночных ферментов, хроническими заболеваниями печени необъяснимого происхождения и с неблагоприятной эпидемиологической историей (введение внутривенно или назально наркотиков, переливание крови, хирургические вмешательства до 1990 года, частые инъекции, татуировки или пирсинг, а также сексуальный контакт). Для диагностики доступны как серологические, так и молекулярно-генетические методы исследований [3].

Серологические маркеры инфицирования ВГС

Первоначально врач при тестировании на ГС начинает с определения в сыворотке крови главного маркера – анти-ВГС. Наличие этих антител может указывать на наличие инфекции в прошлом или на текущую инфекцию (в сочетании с положительным результатом анализа на рибонуклеиновую кислоту вируса гепатита С [РНК ВГС]) [4].

В современной клинической практике антитела против множественных эпитопов ВГС обнаруживаются с помощью коммерчески доступных иммуноферментных (ИФА) тест-систем 2-го и 3-го поколения. В этих наборах реагентов ВГС-специфические антитела из сыворотки захватываются рекомбинантными белками ВГС, а затем определяются вторичными антителами против иммуноглобулинов классов G и M (IgG или IgM), меченные ферментами, которые катализируют развитие цветной реакции.

Первый ИФА для обнаружения ВГС-специфических антител был основан на эпитопах ВГС, полученных из NS4 региона (С-100), имел низкую специфичность и чувствительность (70-80%) [3]. C-100-антитела появляются через 16 недель после инфицирования ВГС. Регионы генома ВГС представлены на рисунке 1.

ИФА тест-системы 2-го поколения дополнительно обнаруживают антитела против эпитопов, полученных из core (C-22), NS3 (C-33) и NS4 (С-100) регионов, имеют более высокую чувствительность (примерно 95%) и низкий риск получения ложноположительных результатов. С помощью этих наборов реагентов ВГС-специфические антитела могут быть обнаружены уже через 10 недель после инфицирования ВГС [5].

ИФА тест-системы третьего поколения разработаны на основе антигена NS5 и сильно иммунизирующего эпитопа из региона NS3, что позволяет сократить время ожидания от момента заражения ВГС до появления положительных серологических реакций. Эти улучшения позволяют обнаруживать анти-ВГС на 4–6 неделе после инфицирования с чувствительностью 99% [6]. Определение количества анти-ВГС IgM может немного сократить «серологическое окно» (период от заражения до появления антител) у небольшого числа пациентов. Однако наличие анти-ВГС IgM не может однозначно разделить острый и хронический ГС, так как некоторые хронические носители могут регулярно вырабатывать анти-ВГС IgM, и далеко не все пациенты, инфицированные остро, реагируют образованием этих антител.

Специфичность серологической диагностики ГС трудно определить, поскольку отсутствует золотой стандарт. Ложноположительные результаты определения антиВГС наиболее часто встречаются у пациентов с наличием ревматоидного фактора в крови, среди беременных, у пациентов с аутоиммунными заболеваниями и др. Ложноположительные результаты определения антиВГС в популяциях с низкой распространенностью ГС, в частности среди доноров крови и органов, требуют проведения подтверждающих тестов. Несмотря на то что иммуноблоттинг для подтверждения положительных результатов выявления антиВГС методом ИФА доступен, эти тесты потеряли свое клиническое значение, т. к. разработаны высокочувствительные методы определения РНК ВГС.

Ложноотрицательные результаты выявления антиВГС могут наблюдаться у пациентов, находящихся на гемодиализе или у лиц с тяжелой иммуносупрессией, например у ВИЧ-инфицированных или больных с гематологическими злокачественными новообразованиями.

ИФА тест-системы третьего поколения, доступные с 1993 года, стали более точными благодаря добавлению рекомбинантных белков NS5. Они обладают спецификой 99,95% при обнаружении анти-ВГС (независимо от содержания в образце γ-глобулинов, фактора ревматоидной активности, С-реактивного белка и прочих веществ), чувствительность составляет 98,9% и позволяет выявлять анти-ВГС через 4–6 недель после заражения.

При наличии положительных серологических результатов анализа на анти-ВГС необходимо выполнить качественное и количественное определение РНК ВГС в сыворотке крови, чтобы удостовериться в наличии активной ВГС-инфекции или её разрешении. Неприемлемо использовать термин «носительство» анти-ВГС у пациентов с нормальным уровнем аланиновой аминотрансферазы в сыворотке крови.

Считается, что при остром ГС один только серологический скрининг является недостаточным, т. к. антиВГС могут появляться позднее от момента инфицирования вирусом. Напротив, РНК ВГС может обнаруживаться в течение нескольких дней после заражения, что делает данный анализ обязательным в диагностике острого ГС. Кроме того, количественное определение РНК ВГС играет важную роль в выборе тактики, длительности и эффективности ПВТ [7].

Молекулярные маркеры для определения заражения ВГС

Тест-системы для выявления антиВГС в большинстве случаев не дают выраженного преимущества по сравнению с определением вирусной РНК для сокращения периода «серологического окна» [8].

В настоящее время доступны как качественные, так и количественные методы определения РНК ВГС.

Для скрининга донорской крови и для подтверждения активной формы инфекции у лиц с антиВГС должен проводиться качественный анализ на РНК ВГС методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР).

К количественному анализу РНК ВГС прибегают для точного определения вирусной нагрузки, что играет ключевую роль в мониторинге ПВТ [9–12]. Методы качественного и количественного определения РНК ВГС заменяются методом реального времени ПЦР, который способен обнаруживать РНК ВГС в диапазоне от 10 до 10 миллионов МЕ/мл (см. рис. 2, табл. 1).

Поскольку интерферонотерапия является дорогостоящей и связана с частыми неблагоприятными побочными эффектами, важна ранняя оценка прогноза ПВТ, что позволит своевременно отменить неэффективную терапию, избежать ее нежелательных явлений и снизить стоимость лечения.

РНК ВГС должна быть подтверждена в четко определяемые периоды терапии для решения вопроса о продолжении ПВТ или ее прекращении. Современные методики по ведению и терапии ВГС-инфекции рекомендуют количественное определение РНК ВГС перед началом ПВТ, на 4, 12, 24, 48-й неделях и через 24 недели после ее завершения. Быстрый вирусологический ответ (БВО), т. е. отсутствие РНК ВГС через 4 недели терапии, является определяющим прогностическим фактором достижения устойчивого вирусологического ответа (УВО) – отсутствие РНК ВГС через 24 недели после завершения ПВТ [14]. Во время ПВТ обычно наблюдают ранний вирусологический ответ (РВО), определяемый как снижение на 2 или более десятичных логарифма (log) уровней РНК ВГС (неполный РВО) или отсутствие РНК ВГС через 12 недель (полный РВО). Отсутствие РВО рассматривают как достоверный прогностический фактор недостижения УВО [15].

Отрицательный результат анализа на РНК ВГС в чувствительном тесте через 24 недели по завершении терапии является целью противовирусного лечения и свидетельствует о достижении устойчивого вирусологического ответа (УВО) [8].

Наблюдается тенденция к тому, что количественный анализ РНК ВГС все чаще используется для индивидуального определения продолжительности ПВТ с новыми противовирусными средствами прямого действия при лечении хронического ГС [16, 17].

После базовой диагностики ГС у каждого пациента, для которого рассматривается проведение ПВТ, должен быть определен генотип ВГС, т. к. рекомендуемые в настоящее время схемы и длительность лечения, а также конкретный выбор доз препаратов (в частности, рибавирина) различаются в зависимости от генотипа вируса.

Исследования показали, что вне зависимости от типа проводимой терапии (пегилированные или короткие интерфероны в сочетании с рибавирином) пациенты, инфицированные ВГС генотипом 2, лучше реагируют на лечение. В то время как носители генотипов 1, 3 и 4 реже отвечают на противовирусную терапию [18]. В связи с этим для пациентов с хроническим ГС рекомендована разная продолжительность ПВТ: для генотипов 2 и 3 – 24 недели, для генотипов 1 и 4 – 48 недель [19].

Золотым стандартом определения генотипа ВГС является анализ нуклеотидной последовательности участка NS5B вирусного генома (рис. 1). В рутинной диагностике ГС применять данный подход весьма затруднительно, поскольку многие коммерческие тест-системы основаны на высокотехнологичной ПЦР с генотип-специфичными праймерами, а также на методе обратной гибридизации.

В основе работы таких наборов лежит использование в качестве матрицы 5’-нетранслируемой области генома ВГС. Однако указанные тест-системы не могут точно дифференцировать новые, редко встречающиеся генотипы ВГС – 7, 8 и 9, а Во многих случаях – субтипы 1a и 1b [8]. Последнее особенно важно, поскольку показано, что субтипы 1а и 1b по-разному отвечают на новые антивирусные препараты прямого действия [8].

В настоящее время вопрос об использовании наиболее адекватного метода генотипирования ВГС в рутинной клинической практике по-прежнему остается открытым.

Морфологические методы, такие как иммуногистохимия, in situ гибридизация или ПЦР по образцам ткани печени, имеют ограниченное применение в диагностике ГС из-за их сложности и низкой доступности, а также недостаточной чувствительности и специфичности по сравнению с серологическими и молекулярно-генетическими методами.

Итоги описания современных методов диагностики ГС отражены в таблице интерпретации результатов исследования, суммированы в виде алгоритма и могут служить памяткой для врача любой специальности (рис. 3, табл. 2).

В настоящее время врач может столкнуть с проблемой, когда, обследуя пациента с хронической патологией печени (при исключении аутоиммунных процессов и лекарственного поражения) на фоне длительно сохраняющейся минимальной активности печеночного воспаления, в сыворотке крови не находит маркеров инфицирования вирусами гепатитов. В таких случаях считают, что инфекция протекает скрыто (латентная инфекция).

Скрытый гепатит С

Первоначально скрытый (латентный) ГС определялся через обнаружение РНК ВГС в сыворотке крови при отсутствии серологических маркеров инфекции. Однако дальнейшие исследования этой формы заболевания привели к изменению понимания скрытого ГС.

В 2004 г. I. Castillo и соавт. была описана скрытая форма ВГС-инфекции, когда у лиц с гепатитом неустановленной этиологии в ткани печени и мононуклеарах периферической крови при помощи ОТ-ПЦР с последующим подтверждением гибридизацией in situ была обнаружена РНК ВГС. При этом в сыворотках крови пациентов отсутствовали как антиВГС (подтверждено двумя независимыми исследованиями ИФА), так и РНК ВГС [19].

Доля распространения скрытого ГС среди групп риска до сих пор не была установлена. Судя по опубликованным данным, латентная форма инфекции имеет относительно высокую частоту выявления. Например, среди 76 пациентов с гепатитом неизвестной этиологии у 35 был установлен острый ГС, что указывает на наличие РНК ВГС без наличия анти-ВГС [20].

В работе P. Jain было показано присутствие среди 27 обследованных пациентов программного гемодиализа скрытого ГС в 90% случаев [21].

Среди 58 ВИЧ-инфицированных пациентов с доказанным половым путем передачи ВИЧ скрытый ГС определен у 6 (10,3%) пациентов.

Данные исследования продемонстрировали, что результаты выявления только серологических маркеров инфицирования ВГС не дают полного представления об истинном распространении этого вируса [22].

T. Pham и коллектив предоставили доказательства в поддержку гипотезы, что скрытый ГС может являться результатом разрешения симптоматического ГС, что подчеркивает необходимость изучения клеток иммунной системы для диагностики ВГС-инфекции [23].

Для диагностики латентной ВГС-инфекции необходимо применение высокочувствительных методов ПЦР и специальных методик обработки материала, в первую очередь ультрацентрифугирования сыворотки для концентрации вирусных частиц. В настоящее время золотым стандартом диагностики скрытой ВГС-инфекции является определение РНК ВГС в ткани печени пациентов. Учитывая высокую травматичность процедуры биопсии печени, активно проводится поиск других надежных методов диагностики.

В 70% случаев скрытого ГС РНК ВГС обнаруживают в мононуклеарах периферической крови. V. Carreno и соавт. было показано, что при исследовании РНК ВГС в мононуклеарах периферической крови пациентов с подтвержденной скрытой ВГС-инфекцией (наличие РНК ВГС в ткани печени и ее отсутствие в сыворотке крови) результат был положительным в 57% (12/21) случаев [24].

Латентная форма инфекции без серологических маркеров ВГС может наблюдаться у пациентов с хроническим гепатитом неясного генеза (криптогенный гепатит), среди больных на гемодиализе и у людей с гепатоцеллюлярной карциномой. Важность обнаружения скрытого ГС объясняется риском передачи вируса при гемотрансфузиях от доноров с ранее не диагностированной ВГС-инфекцией.

Различают две разновидности латентной HCV-инфекции:

• 1-й тип – выявление РНК ВГС в ткани печени у больных хроническим заболеванием печени неуточненной этиологии в отсутствие антиВГС и РНК ВГС в сыворотке; • 2-й тип – определение РНК ВГС в ткани печени у больных со спонтанным разрешением острой инфекции или с элиминацией РНК ВГС из сыворотки крови в результате ПВТ при сохраняющихся в сыворотке крови антиВГС.

Исследования, проведенные с использованием гибридизации in situ, показали, что в тканях печени пациентов с латентной ВГС-инфекцией число инфицированных гепатоцитов значительно ниже по сравнению с гистологически подтвержденными случаями ХГС. Кроме того, у таких пациентов показатели аланиновой аминотрансферазы, гамма-глобулинов и альфа-фетопротеина значительно ближе к норме. В то же время, при скрытой ВГС-инфекции в ткани печени наблюдаются выраженные проявления стеатоза [24].

Было показано, что в сравнении с пациентами с ХГС или гепатитом неуточненной этиологии у лиц со скрытой ВГС-инфекцией наблюдается усиленная пролиферация CD 8+ Т-лимфоцитов и выработка гамма-интерферона в ответ на антигенную стимуляцию белками NS3 и NS4 ВГС.

Таким образом, можно предположить, что формирование скрытой ВГС-инфекции у таких пациентов связано с перестройкой функционирования иммунной системы, проявившейся в контроле над ГС.

Второй немаловажный вопрос в данной проблеме для клинициста: нужно ли и как лечить таких пациентов?

В 2006 году группа ученых под руководством М. Pardo провела 6-месячный курс лечения (пегилированный интерферон в сочетании с рибавирином) для 10 пациентов с латентной ВГС-инфекцией и последующим наблюдением в течение 24 недель. Несмотря на то, что у 8 из них в монокуларах периферической крови к моменту окончания ПВТ не была обнаружена РНК ВГС, устойчивый результат достигнут лишь у 3 больных [25].

Скрытая ВГС-инфекция в настоящее время является хорошо описанным явлением, особенно имеющим значение для службы переливания крови и трансплантологии. Кроме того, дальнейшее ее изучение позволит лучше понять механизмы хронизации ВГС инфекции, а также разработать новые рекомендации в отношении терапии пациентов с ХГС.

Сколько делается анализ на гепатит С

Многие задаются вопросом, через какое время покажет положительный результат? Средняя продолжительность выполнения исследования составляет 5–7 дней с момента поступления биологического материала в лабораторию. Сроки готовности результатов зависят от сложности анализа и вида вирусной инфекции.

Если вирус не был обнаружен, результаты анализов могут быть готовы в течение 1–2 дней после получения биологического материала.

Экспресс-тесты выполняются за 20 минут с точностью 98-99%. Для этих тестов используют специальные реагенты, которые взаимодействуют с антителами к гепатиту С. Данные тестирования можно проводить в домашних условиях, что является существенным преимуществом. Их можно приобрести в аптеке без рецепта, а интерпретация результатов не вызывает затруднений.

В данном случае у пациента найдены антитела к вирусу гепатита С

Профилактика гепатита С

Во избежание заражения гепатитом С следует соблюдать некоторые основные рекомендации:

• использовать презерватив как метод барьерной контрацепции во время сексуальных отношений;
• иметь личные средства гигиены, такие как зубная щетка, швейная нитка, бритва, набор для маникюра и прочее;
• людям с наркозависимостью следует избегать инъекционных наркотиков, так как совместное использование шприцев распространено среди наркоманов;
• обязательно пройти вакцинацию против гепатита А и В;
• в медучреждениях необходимо следить за тем, чтобы инъекции делали только с использованием одноразовых стерильных инструментов и шприцов;
• выбирать услуги маникюра только у надежных специалистов;
• медицинские работники должны быть осторожны и использовать средства индивидуальной защиты, такие как маски, перчатки, халаты и прочее.

Предупредить заболевание намного легче, чем лечить его. А гепатит С лечится очень долго, часто терапия не дает никакого результата или возникают различные осложнения. Что же делать, если произошел контакт с больным или носителем? Как называются препараты для экстренной профилактики?

После контакта с носителем или больным человеком вводят препарата Рибаверин Медуна и альфа-интерферона. В случае когда анализ показывает наличие вируса, необходимо оградить печень от лишнего негативного воздействия, чтобы не ухудшить свое состояние.